一步法SDS-PAGE AB液快速制胶试剂盒10％
货号：P0105
存储条件：APS，-30~-15℃保存，≤0℃运输，可在2~8℃保存至少3个月；其他组分，2~8℃保存。
产品简介：
一步法SDS-PAGE AB液快速制胶试剂盒10％适用于蛋白聚丙烯酰胺凝胶的快速制备。本试剂盒采用上层胶和下层胶的预混配方，只需将试剂两两混合，加入促凝剂即可凝胶，简便快捷。所配的上层胶带有颜色，方便点样和区分不同凝胶。试剂盒提供的改良型促凝剂APS，具有良好的稳定性和促凝效果，配胶过程中无需添加TEMED。本试剂盒可配制125块mini PAGE胶(以 0.75 mm厚度胶计算)。
产品组分
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组 分 |
货号 |
P0105 |
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上层胶 A液 |
P0105-1 |
80 ml |
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上层胶 B液 |
P0105-2 |
80 ml |
|
下层胶 A液(10%) |
P0105-3 |
250 ml |
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下层胶 B液 |
P0105-4 |
250 ml |
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APS |
P0105-5 |
8 ml |
凝胶浓度选择参照
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货号 |
试剂盒浓度 |
蛋白z佳分离范围 |
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P0065 |
6% |
50-150KD |
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P0085 |
8% |
30-130KD |
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P0105 |
10% |
20-100KD |
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P0125 |
12% |
10-70KD |
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P0155 |
15% |
10-55KD |
操作流程：
以制备一块0.75/1.0/1.5 mm的PAGE胶为例。
下层胶配方
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凝胶厚度 |
下层胶 A液 |
下层胶 B液 |
APS |
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0.75mm |
2.0ml |
2.0ml |
40ul |
|
1.0mm |
2.7ml |
2.7ml |
60ul |
|
1.5mm |
4.0ml |
4.0ml |
80ul |
上层胶配方
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凝胶厚度 |
上层胶 A液 |
上层胶 B液 |
APS |
|
0.75mm |
0.5ml |
0.5ml |
10ul |
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1.0mm |
0.75ml |
0.75ml |
15ul |
|
1.5mm |
1.0ml |
1.0ml |
20ul |
1. 各组分在使用前请颠倒混匀6-8次。
2. 下层胶配制：取等体积下层胶A液和下层胶B液，各2.0/2.7/4.0 ml，混匀。
3. 上层胶配制：取等体积上层胶A液和上层胶B液，各0.5/0.75/1.0 ml，混匀。
4. 向步骤2的混合溶液中加入40/60/80 μl的APS，立即充分混匀，然后注入制胶玻璃板中，使液面距短玻璃板上沿约1.5cm。
注1：此溶液一般过量，请勿全部注入。
注2：混匀操作避免剧烈振荡，在灌注的过程中避免将气泡灌入制胶玻璃板中。
注3：灌注下层胶后用ddH2O或醇封闭，待下层胶凝固后再灌注上层胶。
5. 向步骤3的混合溶液中加入10/15/20μl的APS，立即充分混匀，无需等待下层胶凝固，即可将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中，轻轻插入梳齿。
注：灌注上层胶溶液可沿着长玻璃板轻缓注入，避免将下层胶冲散。
6. 待胶凝固后(室温约20-30 min)，拔去梳齿即可用于电泳。
注：请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。
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